|
荧光测量在许多生物学（叶绿素和类胡萝卜素）、生物医学（病变的荧光诊断）和环境科学应用中是非常必要的一种手段。荧光测量通常需要高灵敏度的光谱仪(推荐使用AvaSpec-2048TEC，积分时间 > 5 seconds)。对于大多数荧光应用来说，产生的荧光能量只占激发光能量的3%左右。荧光的光子能量比激发光的光子能量要小（所以波长要长），而且一般都是散射光（在各个方向上辐射能量）。
对于荧光光谱仪测量装置来说最重要一点是避免激发光进入光谱仪，这可以通过不同方法实现，各种方法不互相排斥：
1. 使用AvaLight-LED作为激发光源（窄带宽），激发光波长不在荧光光谱范围内。
2. 把（干涉）带通或低通滤光片与AvaLight-HAL卤钨灯一起使用得到高强度窄带宽的激发光。
3. 确保激发光与荧光光路是90度垂直正交的，这样激发光就不会进入接收光纤（使用CUV-UV/VIS-FL或CUV-DA）。
4. 利用荧光的迟豫时间把激发光和与积分时间起始时的同步激发脉冲分离开。此时需要一个脉冲光源(脉冲激光器或AvaLight-XE脉冲氙灯)和一台AvaSpec-2048FT快触发光谱仪（可通过软件控制延迟时间）。
|
荧光光谱仪产品图
典型的荧光测量系统如左图所示:?
 ?
|
| | |
| 荧光光谱仪测量常用配置:
|
|
光谱仪
|
AvaSpec- 2048 光谱仪 ( 可选 –FT 或者 –TEC 型光谱仪 ) |
|
VA 光栅 (360-1100nm), 200μm 狭缝 , DCL-UV, OSC
|
|
软件
|
AvaSoft-Full 全功能软件
|
|
光源
|
AvaLight-LED470 LED 光源，或 AvaLight-HAL 卤钨灯 带 CUV-HAL 和干涉滤光片
|
|
光纤
|
FCR-UV200/600-2-IND ：带 FCR-FLTIP-IND 或 2 根 FC-UV600-2 光纤： UV/VIS 谱段 , 600 μm 芯径 , 2 米 长 , SMA 接头
|
|
附件
|
CUV-DA 或 CUV-HAL 或 CUV-FL-UV/VIS |
|
什么是化学发光
化学发光是物质在进行化学反应过程中伴随的一种光辐射现象，可以分为直接发光和间接发光。直接发光是最简单的化学发光反应，有两个关键步骤组成：即激发和辐射。如A、B两种物质发生化学反应生成C物质，反应释放的能量被C物质的分子吸收并跃迁至激发态C*，处于激发的C*在回到基态的过程中产生光辐射。这里C*是发光体，此过程中由于C直接参与反应，故称直接化学发光。
间接发光又称能量转移化学发光，它主要由三个步骤组成：首先反应物A和B反应生成激发态中间体C*(能量给予体)；当C*分解时释放出能量转移给F(能量接受体)，使F被激发而跃迁至激发态F*；最后，当F*跃迁回基态时，产生发光。
一个化学反应要产生化学发光现象, 必须满足以下条件: 第一是该反应必须提供足够的激发能, 并由某一步骤单独提供, 因为前一步反应释放的能量将因振动弛豫消失在溶液中而不能发光; 第二是要有有利的反应过程, 使化学反应的能量至少能被一种物质所接受并生成激发态; 第三是激发态分子必须具有一定的化学发光量子效率释放出光子, 或者能够转移它的能量给另一个分子使之进入激发态并释放出光子。
化学发光分析测定的物质可以分为三类：第一类物质是化学发光反应中的反应物；第二类物质是化学发光反应中的催化剂、增敏剂或抑制剂；第三类物质是偶合反应中的反应物、催化剂、增敏剂等。这三类物质还可以通过标记方式用来测定其他物质，进一步扩大化学发光分析的应用范围。
化学发光反应的发光类型通常分为闪光型（flash type）和辉光型（glow type）两种。闪光型发光时间很短，只有零点几秒到几秒。辉光型又称持续型，发光时间从几分钟到几十分钟，或几小时至更久。闪光型的样品必须立即测量，必须配以全自动化的加样及测量仪器。辉光型样品的测量可以使用通用型仪器，也可以配有全自动化仪器。 |
|
荧光光谱仪销售咨询电话：010-84574045, 010-84574046, 010-84574057 |
|
|
